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Um modelo de regressão não linear de quatro parâmetros (4PL) é melhor utilizado quando se deseja analisar uma curva sigmoidal, que pode ser de baixa ou alta resposta. Se a curva não for simétrica, então é melhor utilizar uma regressão não linear com 5 parâmetros (5PL). Crie um gráfico da concentração em função da resposta, aplicando a seção linear da curva de resposta. Esse método é comumente utilizado para medir os resultados de imunoensaios enzimáticos de fase sólida (ELISA).
Instruções
A determinação da curva sigmoidal é muito utilizada em ensaios microbiológicos (Comstock Images/Comstock/Getty Images)-
Escreva a fórmula abaixo:
y = d + (a – d)/ [1 + (x/c)b]
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Encontre o valor de a. Esse é o valor correspondente à concentração de zero, ou a assíntota mínima.
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Encontre o valor de b. Essa é a inclinação da curva, ou coeficiente angular, que pode ter valor positivo ou negativo.
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Encontre o valor de c. Esse é o ponto da curva onde a curvatura da concavidade muda de direção, também chamado de ponto médio.
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Encontre o valor de d, que é o valor correspondente à concentração infinita, ou a assíntota máxima.
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Determine x, que será o valor da diluição. Para encontrar uma solução de base relativa, siga a fórmula:
Diluição relativa = (amostra / máxima diluição seriada) * 100
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Calcule o valor de y, após a determinação de todos os outros parâmetros. Esses números são bastante precisos para a determinação da densidade óptica da curva sigmoidal.
Dicas
- Esse artigo foi escrito por estudantes de microbiologia.